Experimente: Isolierung des Proteins
GFP, Polyacrylamid-Gelelektrophorese (PAGE), Proteinbestimmung,
Klassenstufe: 11-13
Dauer: ca. 7 Std.
Materialkosten pro Person: 8 Euro
erforderliche Theoriekenntnisse: Replikation,
Transkription, Translation, Struktur von Protein, Aminosäure,
Ribosomen.
Proteine
bestimmen Form und Funktion der Organismen. Sie sind
für so unterschiedliche Aktivitäten wie Transport,
Enzymreaktion, Skelettbildung oder Signalübermittlung
verantwortlich. Im Praktikum wird das GFP (Green
Fluorescent Protein) untersucht. Dieses Protein stammt
ursprünglich aus der Qualle Aequoria victoria,
wird aber mittlerweile vor allem in der Zellbiologie
als Reporterprotein eingesetzt. In unserem Experiment
wird GFP aus Bakterienkulturen isoliert und durch
Affinitäts-Chromatographie aufgereinigt. Die Qualität
der Aufreinigung wird anschließend in einer
SDS-Polyacrylamid-Gelelektrophorese (PAGE) und die
Quantität mit einem Proteinbestimmungstest untersucht.