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Schülersymposium
 

 

Untersuchung der ß-Galactosidase

Experimente: PCR, Plasmidisolierung, ELISA, Agarose-Gelelektorphorese
Klassenstufe: 11-13
Dauer:
ca. 7 Std.
Materialkosten pro Person: 10 Euro
erforderliche Theoriekenntnisse: Aufbau der DNA, Basenpaarung, DNA-Dopplhelix, Anwendung der PCR, Taq-Polymerase, Aufbau Plasmide, Antibiotikaresistenz, Immunsystem.

In diesem Praktikum werden verschiedene Techniken angewendet, um die ß-Galactosidase in Bakterien nachzuweisen. Dazu werden in einem ersten Schritt Bakterienzellen lysiert. Das Lysat wird dann verwendet, um ein Plasmid zu isolieren, das das ß-Galactosidase-Gen trägt. Anschließend wird das selbst isolierte Plasmid als Vorlage in einer Polymerase-Kettenreaktion eingesetzt, um das ß-Galactosidase-Gen zu vervielfältigen. Die Überprüfung der Ergebnisse geschieht mit der Agarose-Gelelektrophorese. Zuletzt wird in einem ELISA mit Hilfe eines spezifischen Antikörpers die ß-Galactosidase selbst nachgewiesen.