Lernlabor
- Schnupperkurs Gentechnik
für
Schüler/innen und auch Lehrer/innen
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4 Tage Gentechnik
im S1 Labor: "vom Gen zum Protein"
der nächste Schnupperkurs wird vom
Donnerstag 26.7.12 bis Sonntag 29.7.2012 stattfinden
Der Kurs ist
für Schüler/innen ab der 11. Klasse vorgesehen (es
sind auch einige Plätze für interessierte Lehrer/innen reserviert)
und vermittelt einen Überblick über
gängige
Techniken der Molekularbiologie. Ziel des Kurses ist die Klonierung
einer
DNA-Sequenz aus dem Bakteriophagen Lambda in den Plasmidvektor
pUC18. Die Eigenschaften von DNA und Proteinen, ihre Isolierung,
Vervielfältigung und Manipulation werden sowohl theoretisch
als auch praktisch untersucht.
Beginnend
mit genomischer DNA wird ein Genabschnitt über die
Polymerase-Kettenreaktion (PCR) vervielfältigt, mit
Restriktionsenzymen zurechtgeschnitten und in einen selbst
isolierten Vektor eingebaut (ligiert). Die Teilnehmer erlernen
dabei zusätzlich
die folgenden Methoden: Gel-Elektrophorese, Transformation,
Blau-Weiß-Selektion.
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Agarose-Gelelektrophorese: links Plasmide
unverdaut,
rechts Plasmide mit Restriktionsenzym geschnitten.
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Nach
erfolgreicher Selektion und Überprüfung der Klone
wechseln wir zur Proteinbiochemie und untersuchen das GFP
(green fluorescent protein). Dies wird aus E.coli-Kulturen
mit der Affinitätschromatographie isoliert. Die Analyse
der Reinheit und Ausbeute erfolgt durch die SDS-Polyacrylamid-gelelektrophorese
und den Bradford Assay.
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Um
auch die Immunbiologie abzudecken wird in einem ELISA ein
Antikörper-Titer bestimmt.
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Kurs
ist auf 16 Teilnehmer begrenzt!
Kursgebühr 80 €
Anmeldung bitte per email
"first
come, first serve" |
Kontakt:
Dr. Fred Engelbrecht
ExploHeidelberg Lernlabor
Tel.: 06221-7299272
Fax: 06221-7299270
email: lernlabor@explo-heidelberg.de
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Programm
Tag 1
Sicherheitsbelehrung
Medienlabor: Restriktionsverdau der DNA am Computer
Plasmidisolierung (pUC18)
PCR eines Fragmentes der DNA des Phagen Lambda
Agarosegelelektrophorese
Restriktionsverdau des pUC18 und des PCR-Produktes
Tag 2
Agarosegelelektrophorese der
Restriktionsverdaus
Ansetzen von Kulturmedium für Bakterien, Autoklavieren
Reinigen des PCR-Produktes
Ligation von PCR-Produkt und Vektor
Transformation von E.coli-Bakterien mit Ligationsansatz
Besichtigung der Explo-Ausstellung
Tag 3
Aufreinigung
eines Proteins mit Affinitätschromatographie
Bestimmung des Proteingehaltes
Polyacrylamid-Gelelektrophorese
Tag 4
Checken der Klone: Plasmidisolierung,
PCR, Agarosegelelektrophorese
ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay)
Abschlußbesprechung
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