unsere Versuche:

Plasmidisolierung

Plasmide sind kleine, ringförmige DNA-Moleküle, die neben der DNA des "Bakterienchromosoms"  innerhalb einer Bakterienzelle vorliegen können. Diese DNA-Moleküle dienen in der Gentechnik als Vektoren um Fremd-Gene in das Bakterium einzubringen. Im Praktikum soll die Isolation eines Plasmids aus einer Bakterienkultur durchgeführt werden. Der Nachweis der isolierten Plasmid-DNA erfolgt durch Agarose Gel Elektrophorese.

Plasmid Restriktionsanalyse

Restriktionsendonukleasen sind Enzyme, die DNA-Moleküle aufschneiden, wobei sie die Schnittstelle an einer spezifischen Nukleotidsequenz erkennen. Man nutzt sie zur Herstellung rekombinanter DNA-Moleküle und schneidet mit ihrer Hilfe den ringförmigen DNA-Strang eines Vektors (z.B. eines Plasmids) an einer bestimmten Stelle auf. In diesem Experiment werden 3 verschiedene Restriktionsendonukleasen verwendet um isolierte Plasmid-DNA zu verdauen. Die resultierenden DNA Fragmente werden anschließend elektrophoretisch getrennt und ausgewertet.

PCR

Die Polymerase-Kettenreaktion (kurz: PCR für engl. Polymerase Chain Reaction) ist eine Methode, um DNA zu vervielfältigen, ohne einen lebenden Organismus, wie z.B. E.coli zu benutzen. PCR wird in biologischen und medizinischen Laboratorien für eine Vielzahl verschiedener Aufgaben verwendet, zum Beispiel für die Erkennung von Erbkrankheiten, für das Erstellen und Überprüfen genetischer Fingerabdrücke, für das Klonieren von Genen und für Vaterschaftstests. Im Versuch vervielfältigen die Teilnehmer eine vorgegebene DNA (Template) mittles PCR. Die PCR Produkte werden dann mittels Agarose Gel Elektrophorese nachgewiesen.

Proteinexpression

Proteine bestimmen Form und Funktion der Organismen. Sie sind für so unterschiedliche Aktivitäten wie Transport, Enzymreaktion, Skelettbildung oder Signalübermittlung verantwortlich. Im Praktikum wird die Expression eines GFP Proteins durchgeführt, das anschließend durch Chromatographie aufgereinigt wird. Danach erfolgt die Analyse der Proteine mittels Polyacrylamid Gelelektrophorese (PAGE).

Bakterientransformation  (nur in mehrtägigen Kursen durchführbar)

Die Transformation ist die Aufnahme von Fremd-DNA durch lebende Bakterien. Sie wird in der Gentechnik eingesetzt um Fremd-DNA in ein Bakterium einzubringen. Dazu müssen die Bakterien aufnahemfähig (kompetent) gemacht werden. Nach der erfolgreichen Transformation können Kulturen dieser veränderten Bakterien angelegt werden und zur Plasmidisolation oder Proteinexpression verwendet werden.

ELISA Immuno Explorer Kit

Simulieren Sie das Ausbrechen einer Krnakheit und verwenden Sie echte Antikörper, um den Ausbruchherd zurückzuverfolgen. Hier wird den Schülern vermittelt, wie Krankheiten (z.B. HIV), genetisch veränderte Organismen und molekulare Anzeichen für Krebs, Schwangerschaft oder Drogenmissbrauch diagnostiziert werden.